Descripción de Producto
El nombre del producto
Nombre genéRico:Kit de extraccióN de áCidos nucleicos
Nombre comercial: ADN/ARN viral Kit de extraccióN ráPida (spin-columna)
El embalaje
DP4611(50 preps) /DP4612(100 preps) /DP4613(200 preps)
La intencióN de uso
Para el aislamiento y purificacióN de alta calidad de ADN/ARN del virus a partir de céLulas, sangre,
El suero, plasma, linfa, líQuido acelular, cultivo celular sobrenadante o diversos virus
La preservacióN de líQuido.
Principio
El kit se aplica la exclusiva áRea de influencia vinculante proteasa/ K para lisar ráPidamente nucleasa de virus
Y la inactivacióN de virus.A continuacióN, el genoma de DNA y RNA absorbe selectivamente a silicified
En el alto de la membrana de la solucióN de sal.Las impurezas como metabolito celular y de las proteíNas...
Se extraen a travéS de una serie de pasos de la centrifugacióN de elucióN-.Por úLtimo purificado
Genoma ADN y ARN se eluyen de la membrana de síLice de sal por la baja del búFer de elucióN EB.
El almacenamiento y la validez
1.Proteinasa K (polvo) se almacena debajo de -20 ±5 ºC;Buffer RW puede almacenarse bajo
2~8ºC durante un mes, y -20±5ºC durante un añO;Los demáS componentes son almacenados bajo
La temperatura ambiente.
2.Este kit seráVáLida durante un añO.Por favor, utilice dentro de su validez.
Instrumentos aplicables
Este modelo es adecuado para BioTeke CR3180 Alta velocidad de sobremesa centríFuga refrigerada
E instrumentos similares.
Requisitos para las muestras
Por favor, utilice muestras frescas o las muestras almacenadas correctamente.Sugerimos experimentos
Realizarse tan pronto como las muestras son recogidos.Por favor, almacenar las muestras de 2~8 °C.
De forma temporal o a -20ºC o -80ºC, para la preservacióN a largo plazo.
Los procedimientos
* Agregue alcohol etíLico absoluta en el búFer de lavado de WB especificado
Antes de usar!
PreparacióN de la proteinasa K:
Agregar 1000 μL de agua de laboratorio en cada pieza de la proteinasa K(polvo seco) (úLtima
La concentracióN es de 40 mg/mL).La mezcla al revéS diez veces hasta que se haya disuelto completamente.
GuáRdelo a 2~8ºC para el uso a corto plazo y -20±5ºC para el almacenamiento a largo plazo.Evitar
Hielo-deshielo repetido durante máS de cinco veces.
1.AñAdir 200 μL de muestra de líQuido (suero, plasma, la sangre, etc.) en un tubo de centríFuga de 1,5 ml.
Para un primer volumen de líQuido muestra menos de 200 μL de, por favor, agregue 1×PBS hasta 200 μL.Si el volumen inicial es de entre 200 μL-300μL de, por favor agregar reactivos
Proporcionalmente en los siguientes procedimientos.Para muestras de tejido, por favor, moler
En primer lugar, utilizar 200 μL de tampóN LB para resuspender y luego agregarla a la lisis de virus buffer.
2.AñAdir 500 μL de buffer de la lisis de virus VL1.AñAda 20 μL de la proteinasa K solucióN (40 mg/mL).
Agitar durante 15 segundos para una mezcla suficiente.A continuacióN, incubar a 65ºC durante 15min.Durante la
La incubacióN, por favor, la mezcla hacia arriba y abajo por 3-4 veces.
3.AñAdir 300 µL absolute alcohol etíLico y luego agitar arriba y abajo para mezclar
A FONDO.
La fuerza adecuada y mezclar es muy importante en los procedimientos anteriores.
La insuficiencia de la mezcla se traduciráEn bajo rendimiento de áCido nucleico.
4.Transferir la solucióN y flocculated precipitacióN (si existe) en una columna de spin
VI (spin columna en el tubo de recoleccióN).Centrifugar a 10.000 rpm por 30s, y vacíA
Filtrado en tubo de recoleccióN.
5.AñAdir 700 µL de solucióN tampóN RW (por favor, garantizar la absoluta alcohol etíLico se agrega antes uso).
Y centrifugar a 12.000rpm durante 30 añOs.Desechar el filtrado.
6.AñAdir 500 µL de solucióN tampóN RW (por favor, garantizar la absoluta alcohol etíLico se agrega antes uso).
Y centrifugar a 12.000rpm durante 30 añOs.Desechar el filtrado.
7.Colocar la columna de spin VI a la coleccióN de tubo y centrifugar a 13.000rpm para
2 min.Retire del búFer de lavado si es posible.De lo contrario, el sobrante de etanol afectará
La siguiente reaccióN.
8.Transferencia de la columna de spin vi a un nuevo tubo de centríFuga y agregar 30-50µL precalienta
(65 ºC -70ºC bañO de agua ) buffer EB al oriente de la adsorcióN de pelíCula.ColóQuelo en
La temperatura ambiente durante 2min.Centrifugar a 12.000rpm durante 1 min.AñAdir la solucióN en el spin
La columna y colocarlo a temperatura ambiente durante 2min.Centrifugar a 12.000rpm durante 1min.
9.El ADN puede almacenarse a 2-8ºC y -20ºC para el almacenamiento a largo plazo.Es mejor invertir
Transcribir el ARN en cfDNA ARN o tienda a -80ºC.
El rendimiento
1.Este kit puede utilizarse para extraer el áCido nucleico de la sangre, plasma y suero
Efectivamente
2.Los resultados del juego son estables y tienen buena repetibilidad.
AtencióN
1.Agregue el etanol en el búFer RW como especificada antes de usar (agregar 60 mL de etanol en PF
15mL RW, o 100mL de etanol de 25mL RW, o de 200 mL de etanol de 50mL RW), y mezcle
Que bien).Compruebe para evitar la repeticióN de agregar!2.Para evitar la disminucióN de actividad y facilitar el transporte, la proteasa K
Como polvo seco.DespuéS de la recepcióN, por favor centrifugar dentro de poco y añAdir 1 mL
Agua estéRil para disolver una concentracióN final (40 mg/mL).Como repite congelar
Descongele y disminuiríA la actividad de proteasa.Por favor paquetes divididos (20 μL por
Paquete) inmediatamente despuéS de la disolucióN y almacenar con -20ºC.
3.Por favor, cubrir la tapa bien cuando haya terminado el uso de soluciones para evitar la volatilizacióN,
La oxidacióN y el cambio de valores de PH despuéS de la larga exposicióN al aire.